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隨著獸醫(yī)防疫工作重要性的逐步提高，PCR檢測(cè)技術(shù)已被獸醫(yī)工作者比較廣泛認(rèn)可，已經(jīng)從實(shí)驗(yàn)室研究走進(jìn)了臨床應(yīng)用階段。如何提高PCR檢測(cè)質(zhì)量，已成為實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員不可回避的一個(gè)問(wèn)題，它直接影響實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果的可信度和獸醫(yī)防疫工作質(zhì)量。我們認(rèn)為，PCR檢測(cè)質(zhì)量的控制是一個(gè)系統(tǒng)工程，總體上涉及三個(gè)方面：一是試驗(yàn)儀器；二是試驗(yàn)試劑與耗材；三是人員操作。任何一個(gè)方面出現(xiàn)問(wèn)題，都會(huì)影響PCR檢測(cè)質(zhì)量。一、試驗(yàn)儀器PCR儀和紫外凝膠成像系統(tǒng)（紫外分析儀或手提紫外等）以及移液器都可能影響PCR檢...

問(wèn)題可能原因解決方法無(wú)產(chǎn)物或產(chǎn)量低模板濃度偏低或偏高電泳檢測(cè)模板濃度，調(diào)整模板用量模板降解重新制備；基因組DNA、cDNA應(yīng)小量分裝后低溫保存模板中含有抑制反應(yīng)的雜質(zhì)純化模板引物濃度不足調(diào)整引物濃度，特別是針對(duì)長(zhǎng)片段PCR引物存在二級(jí)結(jié)構(gòu)重新設(shè)計(jì)引物，避免二級(jí)結(jié)構(gòu)；優(yōu)化退火溫度引物降解引物應(yīng)高濃度小量分裝，-20℃保存，避免反復(fù)凍融Mg2+濃度偏低適當(dāng)提高M(jìn)g2+濃度，從1mM到3mM以0.5mM間隔遞增，針對(duì)不同模板和引物摸索佳Mg2+濃度dNTP降解-20℃保存，小量分裝...

移液器是實(shí)驗(yàn)室里面長(zhǎng)使用的實(shí)驗(yàn)儀器之一，基本上每一個(gè)實(shí)驗(yàn)室人員都曾經(jīng)或現(xiàn)在使用過(guò)移液器，因而也會(huì)遇到移液器使用時(shí)的一些問(wèn)題。筆者總結(jié)歸納了移液器使用時(shí)常見(jiàn)的問(wèn)題與解答大全，希望對(duì)于大家有所幫助：移液器使用時(shí)常見(jiàn)的問(wèn)題與解答大全：?jiǎn)栴}可能原因提議移液器滲漏多道移液器吸嘴里不均衡的液體水平·吸嘴與移液器吸嘴基部不配套·換成質(zhì)量一致的吸嘴（例如：ExpelPlusTM吸嘴）·當(dāng)裝吸嘴在多道移液器上時(shí)吸嘴架彎曲·換成更堅(jiān)固的吸嘴架·吸嘴接觸不緊密·稍用力擠壓吸嘴（然而不要用力過(guò)量）不...

1、加水：先將排水閥關(guān)閉，調(diào)整總閥至“全排”。然后，開(kāi)啟進(jìn)水閥，放蒸餾水至蒸汽發(fā)生器內(nèi)，待水進(jìn)至距水表頂端大約1～2cm處時(shí)，關(guān)閉進(jìn)水閥，并將總閥調(diào)至“關(guān)閉”。2、裝鍋：將待滅菌物品裝入鍋內(nèi)，注意不要塞得過(guò)緊過(guò)滿，盛有培養(yǎng)基的三角瓶和試管應(yīng)立放或適度傾斜．以免滅菌過(guò)程中培養(yǎng)基污染棉塞。3、關(guān)門：按順時(shí)針?lè)较蜣D(zhuǎn)動(dòng)緊鎖手柄至紅箭頭處，使撐擋進(jìn)入門圈內(nèi)。然后旋動(dòng)八角轉(zhuǎn)盤，使門和墊圈密合，以滅菌時(shí)不漏氣為度，不宜太緊，以免損壞墊圈。4、通電加溫：待電源控制開(kāi)關(guān)的旋鈕旋至“開(kāi)”處，電源...

目前所有的高壓滅菌器都要求工作時(shí)使用蒸餾水或純水，因?yàn)檎麴s水具有純凈、無(wú)雜質(zhì)、無(wú)離子，不會(huì)產(chǎn)生水垢等特性。如果高壓滅菌器不使用蒸餾水，會(huì)對(duì)機(jī)器造成損傷。如細(xì)管路堵塞，干燥后在手機(jī)表面形成水垢、水斑，并沉積在高壓滅菌器內(nèi)的蒸汽傳感器，溫度傳感器表面上，使傳感器工作失常，影響高壓滅菌器的正常使用，所以使用純凈的蒸餾水很重要。按照標(biāo)準(zhǔn)，高壓滅菌器使用的純凈水的電導(dǎo)率不要超過(guò)15us/cm，但目前許多醫(yī)院都是自己生產(chǎn)或外購(gòu)蒸餾水，如生產(chǎn)過(guò)程控制不好，會(huì)使其中的水質(zhì)有高有低，另外一個(gè)原...

在我國(guó)，通常所說(shuō)的“瘦肉精”則是指克倫特羅。它曾經(jīng)作為藥物用于治療支氣管哮喘，后由于其副作用太大而遭禁用。瘦肉精是一類動(dòng)物用藥，有數(shù)種藥物被稱為瘦肉精，例如萊克多巴胺（Ractopamine）及克倫特羅（Clenbuterol）等。將瘦肉精添加于飼料中，可以增加動(dòng)物的瘦肉量、減少飼料使用、使肉品提早上市、降低成本。但因?yàn)榭紤]對(duì)人體會(huì)產(chǎn)生副作用，各國(guó)開(kāi)放使用的標(biāo)準(zhǔn)不一。其它這樣類似藥物還有沙丁胺醇（Salbutamol）和特布他林(Terbutaline)等，同樣能起到“瘦肉”...

酶標(biāo)儀實(shí)際上就是一臺(tái)變相的光電比色計(jì)或分光光度計(jì)，其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計(jì)基本相同。圖示是一種單通道自動(dòng)進(jìn)樣的酶標(biāo)儀工作原理圖。光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過(guò)濾光片或單色器變成一束單色光，進(jìn)入塑料微孔極中的待測(cè)標(biāo)本。該單色光一部分被標(biāo)本吸收，另一部分則透過(guò)標(biāo)本照射到光電檢測(cè)器上，光電檢測(cè)器將這一待測(cè)標(biāo)本不同而強(qiáng)弱不同的光信號(hào)轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的電信號(hào)。電信號(hào)經(jīng)前置放大，對(duì)數(shù)放大，模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號(hào)處理后送入微處理器進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和計(jì)算，后由顯示器和打印機(jī)顯示結(jié)果。微處理機(jī)還通過(guò)控制電路控...

影響電泳分離的主要因素：1.待分離生物大分子的性質(zhì)：待分離生物大分子所帶的電荷、分子大小和性質(zhì)都會(huì)對(duì)電泳有明顯影響。一般來(lái)說(shuō)，子帶的電荷量越大、直徑越小、形狀越接近球形，則其電泳遷移速度越快。2.緩沖液的性質(zhì)：緩沖液的pH值會(huì)影響待分離生物大分子的解離程度，從而對(duì)其帶電性質(zhì)產(chǎn)生影響，溶液pH值距離其等電點(diǎn)愈遠(yuǎn)，其所帶凈電荷量就越大，電泳的速度也就越大，尤其對(duì)于蛋白質(zhì)等兩性分子，緩沖液pH還會(huì)影響到其電泳方向，當(dāng)緩沖液pH大于蛋白質(zhì)分子的等電點(diǎn)，蛋白質(zhì)分子帶負(fù)電荷，其電泳的方向...

1.1溫度制冷當(dāng)轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)時(shí)，空氣摩擦生熱，轉(zhuǎn)子溫度會(huì)上升，試管中的樣品溫度也會(huì)升高。由于生物學(xué)樣品對(duì)溫度敏感。一般要求離心實(shí)驗(yàn)中溫度保持4℃。沒(méi)有電腦控制的智能化技術(shù)，是不可能做到±1℃的精度。因此，用制冷機(jī)對(duì)離心腔冷卻，而達(dá)到冷卻轉(zhuǎn)子、冷卻樣品溫度的目的。但測(cè)量旋轉(zhuǎn)中的轉(zhuǎn)子的實(shí)際溫度極為困難，國(guó)內(nèi)外都采用在離心腔底部離轉(zhuǎn)子較近處理設(shè)溫度傳感器，間接測(cè)量轉(zhuǎn)子溫度。這里T樣品=T腔+T補(bǔ)償。T補(bǔ)償又與轉(zhuǎn)子的類別、轉(zhuǎn)速及運(yùn)行時(shí)間有關(guān)。1.2無(wú)刷電機(jī)直接驅(qū)動(dòng)離心機(jī)...

離心機(jī)大量應(yīng)用于化工、石油、食品、制藥、選礦、煤炭、水處理和船舶等部門。實(shí)驗(yàn)室多種離心機(jī)的優(yōu)缺點(diǎn)羅列：三足離心機(jī)：普通離心機(jī)，用途廣泛，間歇工作，造價(jià)低廉，型號(hào)品種也較多，缺點(diǎn)是出料麻煩，耗費(fèi)人工。平板離心機(jī)：衛(wèi)生度高，密封性好，符合GMP規(guī)范，缺點(diǎn)是卸料麻煩吊袋離心機(jī)：卸料方便，安全性高，可分離較細(xì)顆粒，晶粒無(wú)破損，缺點(diǎn)是造價(jià)高。刮刀離心機(jī)：卸料省時(shí)，造價(jià)中等，是目前較流行的產(chǎn)品系列，不足之處是晶料有破損，不宜處理較細(xì)顆粒。沉降離心機(jī)：適合處理具有粘性，極細(xì)，比重差較大的物...

紅細(xì)胞壓積(packedcellvolume，PCV)又稱紅細(xì)胞比容(hematocrit，Hct)，是指紅細(xì)胞在血液中所占容積的比值，測(cè)定時(shí)將抗凝血在一定的條件下離心沉淀，即可測(cè)得每升血液中血細(xì)胞所占容積的比值。1．原理在100刻度玻璃管中，充入抗凝血至刻度，經(jīng)一定時(shí)間離心后，紅細(xì)胞下沉并緊壓于玻璃管中，讀取紅細(xì)胞柱所占的百分比，即為紅細(xì)胞壓積容量(PCV又稱壓容、比容)。2．器材(1)溫氏管：管長(zhǎng)11cm，內(nèi)徑約2.5mm，管壁有100個(gè)刻度。一側(cè)自上而下標(biāo)有0～10...

離心機(jī)新技術(shù)簡(jiǎn)介1．1溫度制冷當(dāng)轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)時(shí)，空氣摩擦生熱，轉(zhuǎn)子溫度會(huì)上升，試管中的樣品溫度也會(huì)升高。由于生物學(xué)樣品對(duì)溫度敏感。一般要求離心實(shí)驗(yàn)中溫度保持4℃。沒(méi)有電腦控制的智能化技術(shù)，是不可能做到±l℃的精度。因此，用制冷機(jī)對(duì)離心腔冷卻，而達(dá)到冷卻轉(zhuǎn)子、冷卻樣品溫度的目的。但測(cè)量旋轉(zhuǎn)中的轉(zhuǎn)子的實(shí)際溫度極為困難，國(guó)內(nèi)外都采用在離心腔底部離轉(zhuǎn)子較近處理設(shè)溫度傳感器，間接測(cè)量轉(zhuǎn)子溫度。這里T樣品=T腔T補(bǔ)償。T補(bǔ)償又與轉(zhuǎn)子的類別、轉(zhuǎn)速及運(yùn)行時(shí)間有關(guān)。1．2無(wú)刷電機(jī)...