技術(shù)文章
在我國,通常所說的“瘦肉精”則是指克倫特羅。它曾經(jīng)作為藥物用于治療支氣管哮喘,后由于其副作用太大而遭禁用。
瘦肉精是一類動物用藥,有數(shù)種藥物被稱為瘦肉精,例如萊克多巴胺(Ractopamine)及克倫特羅(Clenbuterol)等。將瘦肉精添加于飼料中,可以增加動物的瘦肉量、減少飼料使用、使肉品提早上市、降低成本。但因為考慮對人體會產(chǎn)生副作用,各國開放使用的標(biāo)準(zhǔn)不一。
其它這樣類似藥物還有沙丁胺醇(Salbutamol)和特布他林(Terbutaline)等,同樣能起到“瘦肉”作用、卻對人體健康危害過大,因而造成安全隱患。它們也因而在遭到禁用。
英文名:
Clenbuterol; Spiropent; Planipart; NAB365;4-Amino-3,5-dichloro-alpha-(((1,1-dimethylethyl)amino)methyl)benzenemethanol
CAS號:37148-27-9
鹽酸克倫特羅結(jié)構(gòu)簡式
分子式:C12-H18-Cl2-N2-O
理化特性
白色或類白色的結(jié)晶粉末,無臭、味苦,熔點161℃,溶于水、乙醇,微溶于丙酮,不溶于已醚。
檢測方法
GB/T 5009.192-2003 動物性食品中克倫特羅殘留量的測定
氣相色譜-質(zhì)譜法(GC-MS)
GC-MS法優(yōu)點是把色譜快速的分離效果和質(zhì)譜高靈敏度的定性分析有機合起來,能在多種殘留物同時存在的情況下對某種特定的殘留物進(jìn)行定性、定量分析,而且具更高的檢測極限。Fente C. A等用GC-MS法檢測牛毛中CLB的殘留,低檢測限為5ng/g[6];Pteer Batioens應(yīng)用氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(GC-MS-MS)對牛、羊、豬組織中的CLB含量進(jìn)行檢測,低檢測限為2ng/g[7];劉琪等用GC-MS法(EI離子源)檢測豬尿中的CLB,檢測限為0.5ng/mL;VanRhijin等用*基硅基或2-二甲基硅基嗎啉衍生物檢測尿提取物中的CLB,衍生物用電脈沖方式或化學(xué)離子化方式掃描,會產(chǎn)生更高的靈敏度。另外,GC-MS法與HPLC法相比,檢測靈敏度更高,假陽性率更低。因此,我國將GC-MS法定為檢測CL B的確證性方法(NY/T468~2001)。
液相色譜法(HPLC)
HPLC適合測定熱不穩(wěn)定和強極性的β-激動劑及其代謝產(chǎn)物,而且,HPLC可以與柱前提取、純化及柱后熒光衍生化反應(yīng)和質(zhì)譜(MS)等系統(tǒng)聯(lián)用,容易實現(xiàn)分析過程的自動化。黃士新等(1995)應(yīng)用紫外檢測器,在λ=243nm,色譜柱:shimpackCLC-ODS150×6.0mn,流速:1mL/min,柱溫:室溫30℃的條件下檢測豬肝臟和豬肉中的CLB殘留,低檢測限可達(dá)2ng/g[4]。國外有人應(yīng)用HPLC (二極管陣列檢測器)測定動物性食品中CLB殘留,測得低檢測限為1.26ng/g,回收率達(dá)98.9%[5]。目前,我國已將HPLC法作為檢測CLB殘留的半確證性方法,低檢測限范圍為1~15ng/g,其優(yōu)點是專屬性好、選擇性強、檢測度較高,而且假陽性率低;缺點是樣品處理時間長,檢測過程煩瑣、難于操作,需貴重儀器,在實際應(yīng)用中受到一定的限制。
酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA )ThermoMK3 FC 酶標(biāo)儀
利用免疫學(xué)抗原抗體特異性結(jié)合和酶的催化作用,通過化學(xué)方法將植物辣根過氧化物酶(HRP)與克倫特羅(CL)結(jié)合,形成酶偶聯(lián)克倫特羅。將固相載體上已包被的抗體(羊抗兔IgG抗體)與特異性的抗克倫特羅抗體結(jié)合,然后加入待測克倫特羅和酶偶聯(lián)克倫特羅,它們競爭性與克倫特羅抗體結(jié)合,洗滌后加底物,根據(jù)有色物的變化計量待測克倫特羅量。若待測克倫特羅多,則被結(jié)合的酶偶聯(lián)克倫特羅少,有色物量就少。用目測法或比色法測定樣品中的克倫特羅含量,比色的佳波長為450 nm,參比波長應(yīng)大于600 nm。
液相色譜—質(zhì)譜/質(zhì)譜法(HPLC-MS/MS)
參見SN/T 1924—2007 進(jìn)出口動物源食品中克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林殘留量的檢測方法。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于動物源性食品肌肉和內(nèi)臟中克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林殘留量的檢測。
試樣中的藥物殘留采用pH5.2的乙酸銨緩沖液提取,同時加入β-鹽酸葡萄糖醛甙酶-芳基硫酯酶進(jìn)行酶解后,提取液經(jīng)C18和SCX雙SPE柱凈化,液相色譜—質(zhì)譜進(jìn)行測定,內(nèi)標(biāo)法定量。
研究歷史
克倫特羅是一種β-興奮劑,添加于飼料中能提高幾種家畜包括豬的瘦肉率。
克倫特羅在家畜和人體內(nèi)吸收好,而且與其它β-興奮劑相比,它的生物利用度高,以至食用了含有克倫特羅的豬肉出現(xiàn)中毒。Zimmer(1976)證實人內(nèi)服20 μg的14C-鹽酸克倫特羅,峰濃度時 ,血漿中克倫特羅原形藥占總的14C-鹽酸克倫特羅的75%。克倫特羅內(nèi)服生物利用度高的事實對估計消費者食用了含有克倫特羅的組織,從中獲得的克倫特羅的量很重要。引起人中毒的動物組織含有克倫特羅原形藥的量差異很大。Martinez-Navarro(1990)報道犢牛肝中克倫特羅原形藥的殘留量為161~291 ppb,Pulce等(1991)報道犢牛肝中克倫特羅的殘留量為375~500 ppb,Salleras等(1995)報道犢牛肝中克倫特羅的殘留量為19~5395 ppb。此外,Maistro等(1995)報道犢牛肌肉中克倫特羅的殘留量為500 ppb。
1ppm的克倫特羅添加于豬飼料中用于促生長,人食用豬肝或豬肺足夠引起中毒。世界沒有任何正規(guī)機構(gòu)批準(zhǔn)克倫特羅作為飼料添加劑用于動物促生長。
毒理簡介
克倫特羅能激動β2-受體,對心臟有興奮作用,對支氣管平滑肌有較強而持久的擴張作用。口服后較易經(jīng)胃腸道吸收。作平喘藥口服成人20-40μg/次,3次/日;兒童5歲以上5-20μg/次,3次/日。人(女性)經(jīng)口TDLo: 4600 ng/kg。小鼠靜脈LD50: 27600 ug/kg。
臨床表現(xiàn)
1.急性中毒有心悸,面頸、四肢肌肉顫動,有手抖甚至不能站立,頭暈,乏力,原有心律失常的患者更容易發(fā)生反應(yīng),心動過速,室性早搏,心電圖示S-T段壓低與T波倒置。
2.原有交感神經(jīng)功能亢進(jìn)的患者,如有高血壓、冠心病、甲狀腺功能亢進(jìn)者上述癥狀更易發(fā)生。
3.與糖皮質(zhì)激素合用可引起低血鉀,從而導(dǎo)致心律失常。
4.反復(fù)使用會產(chǎn)生耐受性,對支氣管擴張作用減弱及持續(xù)時間縮短。雖然克倫特羅殘留的毒作用為輕度的,但美國FDA研究表明,應(yīng)用擬交感神經(jīng)藥者或?qū)η八庍^敏者,對克倫特羅的反應(yīng)要比正常健康個體更為嚴(yán)重。
FDA擔(dān)心非法應(yīng)用克倫特羅可導(dǎo)致此藥的生產(chǎn)工人患病或死亡。FDA指出,職業(yè)性吸入克倫 特羅對心血管的影響,可能要比經(jīng)食品攝食的危害性更大,但有待于進(jìn)一步的證實。
急救治療
1.口服后即洗胃、輸液,促使毒物排出。
2.在心電圖監(jiān)測及電解質(zhì)測定下,使用保護(hù)心臟藥物如6-二磷酸果糖(FDP)及β1-受體阻滯劑倍他樂克。
識別和預(yù)防
識別方法
(1)看該豬肉是否具有脂肪(豬油),如該豬肉在皮下就是瘦肉或僅有少量脂肪,則該豬肉就存在含有“ 瘦肉精”的可能。
(2)喂過“瘦肉精”的瘦肉外觀特別鮮紅,后臀較大,纖維比較疏松,切成二三指寬的豬肉比較軟,不能立于案,瘦肉與脂肪間有黃色液體流出,脂肪特別薄;而一般健康的瘦豬肉是淡紅色,肉質(zhì)彈性好,瘦肉與脂肪間沒有任何液體流出。
(3)購買時一定看清該豬肉是否有蓋有檢疫印章和檢疫合格證明。
預(yù)防方法
1.控制源頭,加強法規(guī)的宣傳,禁止在飼料中摻入瘦肉精。
2.加強對上市豬肉的檢驗。
3.消費者購買豬肉時要揀帶些肥膘(1-2cm)的肉,顏色不要太鮮紅,豬內(nèi)臟因瘦肉精殘留量多不宜食用。
其它相關(guān)
用量規(guī)定
許多化學(xué)物質(zhì)被稱為瘦肉精,其中培林(雷托巴胺,萊克多巴胺 ,Ractopamine)毒性極低、代謝快速(無累積性),因此被美國等國家允許添加入豬飼料,日本也允許使用培林(Ractopamine)的豬肉進(jìn)口。目前*有美國等24國開放使用培林,有160多國仍禁用。